問答題λYES（酵母—大腸桿菌穿梭載體）是構建 cDNA 文庫的高效載體，這種載體是λ噬菌體基因組與一個在大腸桿菌和酵母中都能復制的質粒巧妙結合而成，它兼有病毒和質粒載體的優(yōu)點。cDNA 被插入載體的質粒部分，然后它能在體外被包裝入病毒顆粒中，包裝起來的載體感染大腸桿菌的效率比質粒本身要高得多。一旦進入了大腸桿菌，λYES中的質粒序列能夠被誘導重組出λ基因組，并進行獨立復制，這就可以從質粒中分離出來，以便進行進一步的遺傳操作。       為了最大限度地提高克隆效率，載體用只有一個切點的限制性內切核酸酶 XhoI（5’-C十 TCGAG）進行切割，然后在 dTTP 存在的情況下，同 DNA 聚合酶一起進行溫育。將一種具有平末端的雙鏈 cDNA 同一段含由兩段寡聚核苷酸組成的雙鏈寡聚核苷酸接頭連接起來，這兩段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC 和5’—GGTAAATC，它們的 5’端都是磷酸。然后將載體和 cDNA混合并連接在一起。采用這種方法用 2μg的7載體和 0.1μg 的 cDNA，構建了一個有 4×10 個克隆的 cDNA 文庫。能夠用XhoI從重組質粒中切出cDNA 嗎？

參考答案： 修飾的載體末端同接頭分子的連接可在載體和cDNA的兩個結合處重新產生XhoI的識別位點(CTCGAG)，因此，可用Xho...